Ingénieur / Ingénieure de recherche scientifique (H/F)
Mission: Ce projet de recherche vise à mieux comprendre les mécanismes cellulaires qui permettent l'adaptation à la signalisation dépendante de la voie ATR Chk1 lors de situations de stress réplicatif. Ces mécanismes jouent un rôle central dans la préservation de l'intégrité du génome, mais peuvent également contribuer à l'apparition d'une instabilité génétique lorsque leur fonctionnement est altéré. Le projet s'appuie sur des approches de biologie cellulaire, de biologie moléculaire et d'imagerie quantitative afin d'identifier les limites fonctionnelles des systèmes de surveillance de l'ADN et leur implication dans les processus de transformation cellulaire Activités: La personne recrutée participera activement aux travaux expérimentaux du projet et aura pour principales missions de: Générer et caractériser des lignées cellulaires génétiquement modifiées exprimant de façon stable des senseurs des points de contrôle de l'intégrité de l'ADN ainsi que différents marqueurs fluorescents constitutifs ou inductibles. Étudier la régulation et le fonctionnement des mécanismes de surveillance de l'ADN dans des conditions physiologiques et après induction de stress génotoxiques. Mettre en œuvre des expériences de vidéo-microscopie sur cellules vivantes associées à différentes approches de perturbation fonctionnelle, notamment par traitements pharmacologiques ou déplétion par siRNA. Réaliser des marquages cellulaires par immunofluorescence et par Proximity Ligation Assay (PLA). Effectuer l'analyse quantitative d'images issues d'expériences de microscopie sur cellules vivantes ou fixées afin d'évaluer les conséquences des perturbations expérimentales sur le devenir cellulaire, la réponse aux dommages de l'ADN et l'accumulation de lésions. Réaliser des préparations chromosomiques de type « metaphase spread » et analyser les anomalies chromosomiques. Présenter et discuter les résultats obtenus lors des réunions d'équipe, séminaires internes et externes à l'unité, en français et en anglais.
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